Esterilização do meio BDA

Materiais necessários

- meio BDA líquido em recipiente de vidro
- panela de pressão com suporte metálico interno
- outros recipientes resistentes a altas temperaturas

Se o meio BDA estiver sólido, ele precisa ser aquecido até ficar completamente líquido e homogêneo antes de ir para a panela de pressão. Isso pode ser feito no microondas.

Atenção! O meio deve ser colocado na panela em um recipiente de vidro resistente a altas temperaturas. Nunca coloque o recipiente vedado na panela de pressão, pois isso pode fazer com que o vidro quebre. Se o recipiente a ser utilizado tiver uma tampa, deixe-a em meia rosca; se ele não tiver tampa, cubra a boca com papel alumínio antes de colocar na panela de pressão.

A panela de pressão deve ter um suporte metálico interno que impeça que o fundo do recipiente de vidro fique em contato com o fundo da panela durante a esterilização, como nas imagens a seguir.

Fonte: http://www.cogumelohobby.com/IMAGENS/suporte_na_panela.jpg 

Fonte: http://www.cogumelohobby.com/IMAGENS/suporte_no_fundo.jpg

Fonte: http://www.pontociencia.org.br/files/experimentos/342/esterilizando-com-uma-panela-de-pressao-3.jpg
Exemplo de suporte caseiro.

O recipiente com o meio BDA não deve ser colocado sozinho na panela de pressão, pois ele pode virar durante a esterilização e/ou manipulação da panela. Para evitar isso, basta colocar alguns recipientes vazios, que vão funcionar como escoras, junto com o recipiente contendo o meio. Naturalmente, todos os recipientes que forem para a panela devem ser resistentes a altas temperaturas.

Como fazer

1 - Coloque o suporte metálico na panela de pressão.
2 - Coloque água na panela, apenas o suficiente para cobrir o suporte metálico.
3 - Coloque o recipiente de vidro com o meio BDA, juntamente com os recipientes escora, na panela.
4 - Tampe a panela e coloque o peso do pino de escape do vapor.
5 - Coloque a panela no fogo alto.
6 - Quando o vapor começar a sair pelo pino, abaixe o fogo; cuide para que a chama seja alta o suficiente para que o vapor continue saindo ininterruptamente.
7 - Conte 30 min depois que o vapor começar a sair e, então, apague o fogo.
8 - Deixe o vapor sair da panela naturalmente.
9 - Abra a panela apenas quando a temperatura estiver baixa o suficiente para que seja possível manuseá-la sem queimar as mãos.

Feito! O meio BDA está esterilizado.

Nesse ponto é possível armazenar o meio em geladeira por até 60 dias. Entretanto, é necessário cuidado redobrado para evitar contaminações. Para isso, o recipiente deve ser sempre mantido bem fechado. Na geladeira, o meio BDA vai para o estado sólido e precisará ser aquecido no microondas para voltar ao líquido.

O próximo passo é a montagem das placas de petri.

Fontes das informações apresentadas aqui:

Livro: https://www.embrapa.br/busca-de-noticias/-/noticia/23379337/livro-sobre-producao-de-cogumelos-por-meio-de-tecnologia-chinesa-modificada-chega-a-3-edicao

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